下面介绍3种广泛应用的特异性rna酶抑制剂:1、rna酶的蛋白质抑制剂是 从人胎盘分离的一种蛋白质可与多种rna酶紧密结合(ki≈3x1010)形成非共价结合的等摩尔复合物,使rna酶失活。此蛋白质体内可能是血管生成素的抑制剂,血管生成素是氨基酸序列和推测的三级结构与胰rna酶类似的一种血管生成因子, 几个以不同的商品名出售这种抑制剂,该蛋白质应置于含5mmol/l二硫苏糖醇(dtt)的50%甘油中,贮存于-20℃。抑制剂制品冻融数次后或放置在氧化条件下即应弃之不用,因为上述处理会使蛋白质变性从而释放出所结合的rna酶。因此,在使用变性剂裂解哺乳动物细胞这一提取rna的初始步聚中不应使用这种蛋白抑制剂。然而职用更温和的裂解方法时应使用这种抑制剂,并且在后续的所有rna纯化步骤中均应有此蛋白质存在。由于酚抽提可以除蛋白质抑制剂,故应在纯化过程中补加几次抑制剂。其最大活性的发挥要求巯基试剂,而且它并不干扰反转录或mrna在无细胞体系中的翻译。2、核糖核苷复合物 这种由(1v)离子和4种核糖核苷之中的任意一种所形成的复合物,是量种过渡态类似物,它能与多种rna酶结合并几科能100%地抑制rna酶的活性。这4种核糖核苷复合物可加入完整细胞中,在rna提取和纯化的所有过程中,其使用浓度都是10mmol/l。所得到的mrna可直接在硅卵母细胞中进行翻译, 并能作为某些外酶促反应(如mrna反转录)的模板。然而核糖核苷复合物强烈抑制mrna在无细胞体系中的翻译,因此必须用含0.1 %羟基喹淋的苯fen[ 用0. 01mol/ltris.cl(ph7.8)平衡]多次抽提以去除之。有几家公司出售核糖核苷复合物。3、macaloid(硅藻上)macaloid是一咱粘土,很多年前就发现它能吸附rna酶,用缓冲液将其制成浆液,以0.015%(w/v)的终浓度溶解细胞。 这种粘土随同它所吸附的rna酶可在后续的rna纯化过程中(如酚抽提后)经离心去除。